ERSTER AKT
Sifare und Farnace, die Söhne des Königs Mithridates, lieben beide Aspasia, die Verlobte ihres Vaters, und kommen nach Ninfea, weil sich das Gerücht verbreitet hat, der König sei im Kampf gegen die Römer gefallen. Während sich die beiden Brüder, die politische Gegner sind, um Aspasia streiten, wobei Farnace von Marzio unterstützt wird, bringt Arbate die Nachricht, dass der von den Römern besiegte König bald in Ninfea landen werde. Dieser hat von den Plänen seiner Söhne erfahren und will beide bestrafen, um so mehr, als Farnace Ismenes Hand ausschlägt. Sifare soll Aspasia die Nachricht bringen, dass der König sie noch heute heiraten wolle. Als Aspasia die Botschaft hört, schwankt sie zwischen Pflicht und Liebe, denn sie ist Sifare zugetan.
ZWEITER AKT
Mithridates hat seine Söhne sowie Aspasia und Ismene in sein Feldlager mitgenommen. Während Sifare den Kampf gegen die Römer aufnehmen will, rät Farnace, durch Marzio überredet, das Friedensangebot der Römer nicht auszuschlagen. Mithridates glaubt, Farnace sei ein Verräter und lässt ihn festnehmen, ebenso Sifare, dessen Beziehungen zu Aspasla dem König nicht verborgen bleiben. Beide Söhne sollen mit dem Tode bestraft werden.
DRITTER AKT
Vergebens versuchen Aspasia und Ismene, den wütenden König zu besänftigen. Mithridates ist dazu nur bereit, wenn Aspasia zu ihm zurückkehrt. Als diese sich weigert, überreicht ihr der König als letztes Geschenk ein Giftfläschchen und rückt mit seinen Truppen gegen das römische Heer vor. Sifare, der von Ismene befreit wurde, kann im letzten Moment Aspasia retten; Farnace wird von Marzio befreit. Mithridates ist besiegt worden und hat sich in sein Schwert gestürzt; sterbend bringt man ihn in den Königspalast. Er ernennt Sifare, dem er Aspasia zur Frau gibt, zu seinem Nachfolger und verzeiht Farnace, nachdem er durch Ismene erfährt, dass auch er gegen die Römer gekämpft hat.